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产品名称:原装GIBCO透析型胎牛血清FBS正品

产品型号:30067-334

产品报价:

产品特点:原装GIBCO透析型胎牛血清FBS正品
货号:30067-334
规格:500ml
品牌:北美源
库存:少量现货

30067-334原装GIBCO透析型胎牛血清FBS正品的详细资料:

原装GIBCO透析型胎牛血清FBS正品

处理:全部血清:收集的血液均在冷藏条件下处理。血清和血分离后立即将血清合并并冷冻。只有符合我们的检测标准的血清才被接受作进一步处理。

热灭活血清:热灭活是在56℃水浴中严格控温30分钟。透析血清:用10,000截留分子量的透析膜在0.15M的NaCl中进行透析,直到葡萄糖水平低于5mg/dl(用邻甲苯胺测试法检验)。γ射线照射血清:可按客户要求对血清进行γ射线照射。通过γ射线照射以灭活各种动物血清(包括胎牛血清、新生牛血清、猪血清和马血清)中的病毒和支原体的方法已经得到证实。研究证实照射剂量在30-45kGy为宜。血清在此照射后物理化学特性和细胞培养表现没有变化。装瓶:粗血清须通过一系列的过滤才成为成品。zui后的过滤步骤包括使用0.2um和0.1um的无菌过滤。胎牛血清须通过三次0.1um过滤,其他血清须通过0.2um过滤。zui终产品的质量控制:我们采取以下方法对每一批次的产品选取一定数量的样品进行质量控制分析:

化学检测:使用低温凝固点的方法检测渗透压,以保证符合产品规范。我们每天使用国家标准的技术研究所标定的标准溶液对我们的渗透压检测仪器进行校准。同样每天使用国家标准技术研究所标定的标准溶液对pH计进行校准。

使用电泳图谱鉴定血清的整体性质。样品被转移到xiao酸纤维素基质中,并在缓冲体系内迁移。条带经染色、清洁、干燥后用密度仪进行扫描,以检测白蛋白和球蛋白组分的相对浓度。为证实是否在适当的条件下进行采血和处理,使用修饰的Fleming方法对血红蛋白进行分光光度检测。

随着动物年龄的增加,血清总蛋白含量也相应地提高。使用自动化的Biuret方法进行总血清蛋白的检测,以确认动物年龄并验证符合产品规范。使用色度计在不同波长下检测样品和Biuret试剂混合波的吸光度。自动计算结果后,与标准曲线比较,即可得到蛋白值(克/公升)。

稳定性检测程序:在每一个标记为体外诊断的产品上显示的效期表明了这个产品具有多长时间的效能。我们的稳定性程序确定和证明了产品效期。我们定期监测批量产品,确定产品在推荐贮存条件下具有可接受效果的时间长度。

微生物学检测:所有血清使用Barile&Kern的大体积方法检测支原体。在推荐方法的检测范围内检测结果是准确的。样品至少应该在肉汤中合并培养3个星期,同时要在琼脂平板上进行不少于4次传代培养。在有氧和厌氧(95%氮,5%CO2)条件下,平板在36±2℃下孵育。在检测过程中,每周对琼脂平板进行一次微生物生长情况检验。使用Dienes染色法对怀疑被污染的琼脂平板进行支原体菌落的检测。然后,对平板进行再次镜检。对孵育肉汤瓶要定期进行浊度和pH值变动的检测。在推荐方法检测范围内,所有血清也要使用Hoechst荧光DNA染色法进行不可在肉汤中培养的支原体(包括M.hyorhinis属)检测。

病毒检测:已知无外来物质的细胞培养基须经过在包含15%测试血清的生长培养基中进行为期21天的三次传代培养。使用对照培养基和已知对外来物质为阴性的血清平行地维持阴性对照培养。整个期间,检测所有的培养情况,以便发现是否存在病毒诱发的细胞形态改变或致细胞病变效应。在14至21天的培养期间,对含有检测血清的平行培养瓶按下面标准病毒检测方法进行评估。

将其中一瓶检测细胞用胰蛋白酶消化,然后把细胞分别加入到总面积为6cm 2 的六室载玻片上。同时准备阴性对照载玻片。在检测培养的单室载玻片上加入牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛细小病毒、牛腺病毒、狂犬病毒和呼肠病毒的染色剂,作为单个的阳性对照。再经过7天培养(总共21天),利用荧光抗体技术检测病毒。

通过对检测培养进行苏木精伊红染色,观察致细胞突变效应(CPE)或其他病毒诱导效应。检测细胞是否存在CPE效应、内含物、多核体或其他异常效应。

内毒素检测:我们用阿米巴变形细胞溶解物(LAL)凝胶法来检测胎牛血清的内毒素含量。

效能检测:
对每一批次的胎牛血清,我们都进行下述培养效能检测。选择血清zui重要的标准是其支持特殊细胞的生长能力。因此,除了保证血清通过严格的品质控制,我们也同时在实验室条件下对血清的三个重要的培养效能进行检测:克隆效率、贴壁效果和二倍体成纤维细胞生长促进。

克隆效率分析:克隆效率实验分析每一批胎牛血清促进小鼠骨髓瘤细胞及其衍生的杂交瘤细胞的克隆和生长能力。下列产品
经验证可用于该实验:
Sp2/0-Ag14(ATCC #CRL 1581)
P3x63-Ag8.653(ATCC #CRL 1580)

每一批胎牛血清都要分别在复制微量滴定平板上加入两种血清浓度和两种细胞接种量(10%血清和1cell/孔,4%血清和5cells/孔)的情况下进行分析。克隆分析结果除以已确定的参照血清值得以归一化。在许多日常杂交选择程序中具有代表性的是高浓度的血清,而低浓度血清在设计血清批次细微差异放大检测中有更为严格的测试。严格的1cell/孔测试是模拟单一杂交选择的实验室条件。为每一批次胎牛血清提供的分析证明报告中的克隆效率值为两次测试条件下的平均值。

克隆分析法:克隆分析法是在复式96孔板中加入两种胎牛血清浓度(10%v/v)和(4%v/v)和两种接种量的情况下进行的。每一次化验中,同时测量前期已验证合格的一批胎牛血清,并将此测量值作为内部参考标准。

    原装GIBCO透析型胎牛血清FBS正品

     

    细胞生长分析法。

    1.使用含10%检测或参照热灭活胎牛血清的已验证的Grace昆明培养基配制完全检测培养基。

    2.将储备Sf9细胞加入50毫升离心管中,在50Xg下离心5分钟。然后将每支试管的沉淀物重新用含10%的检测或参照热灭活胎牛血清完全培养基配制成悬浮液。

    3.反试管颠倒几次,然后每支试管倒出1毫升样品。用台盼蓝染色排除进行活细胞计数。

    4.如果活性≥80%,把试管再颠倒几次并取出0.25毫升样品。然后用Coulter计数器进行细胞计数。

    5.将细胞加入Erlenmeyer瓶中,使其zui终细胞浓度为2.75X10 5 cells/ml。孵育后,再一次进行细胞计数,以保证细胞密度为2.5X10 5 至3.0X10 5 cells/ml。

    6.将培养瓶放到摇床上,在27℃±1℃、80-90rpm条件下孵育96小时。

    7.从每一培养瓶中分别取出0.25毫升样品,用Coulter计数器进行计数。同时取出一定量的样品进行细胞活性检测。

    8.将检测细胞密度与参照细胞密度相比即可得到相对细胞密度(RCN)。

    噬菌体检测:我们利用溶菌斑分析法来检测是否存在噬菌体。从每一批血清中取具代表性的样品加入胰蛋白酶磷酸琼脂中,并在其加入含有噬菌体敏感的大肠杆菌悬浮液(C-3000或K-12)。然后,混合物会在胰蛋白酶磷酸琼脂平板上分层,在36±2℃环境下孵育约24小时后,观察平板上溶菌斑的形态。

     

    【简单介绍】

    gibco30067-334透析型胎牛血清新西兰500ml

    很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。
    血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。

    【详细说明】

    gibco    30067-334    透析型胎牛血清    新西兰        500ml

    二、主要技术指标
    目前国内血清的质量标准是2005版的《中华人民共和国药典》,主要指标有以下几点:

    1、内毒素
    标准为不高于5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分,因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前,国产血清基本都能达到这一要求,很多进口胎牛血清内毒素含量反而更高,如Gibco 26140,只要求不高于50EU/ml,高出我国标准10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清质量也未见影响。可见,内毒素含量偏高不影响质量,除非含量极高,预示着已经污染。

    2、总蛋白含量
    胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采血的牛龄偏大,不是胎牛,数值偏低,表明血清可能掺水了。

    3、血红蛋白
    标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。

    4、pH
    国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。

    5、微生物
    包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型"微生物几乎能100%控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能清除。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清除,但对血清质量影响不大。病原性病毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中基本都控制的很好。

    6、免疫球蛋白
    国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出采血的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。

       

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